

蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析
产品名称: 蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析
英文名称: Protein-Protein Interactions Pull-Down Assays
产品编号: llc1249
产品价格: 询价
产品产地: 中国北京
品牌商标: 百泰派克生物科技
更新时间: 2025-05-20T12:01:30
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蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析是一种基于亲和富集原理、用于研究细胞内蛋白质之间物理结合关系的生物化学分析技术。它通过在体外条件下模拟蛋白质之间的结合状态进而富集目标复合物,并通过后续检测手段对这些复合物进行识别和定性分析。这项技术不仅有助于揭示蛋白质参与的信号通路、调控网络和功能复合物,还在疾病机制研究、药物靶点确认以及蛋白功能注释等方向发挥作用。蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析的研究基础是细胞中的生理过程几乎都依赖于多种蛋白协同作用完成,单一蛋白的功能只有在复杂的互作网络中才能被正确解读。因此,这种分析方法已成为蛋白质组学与分子细胞生物学中不可或缺的实验策略。蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析不仅可以用于基础功能研究,在疾病机制解析中也有重要价值。许多致病突变并非直接破坏蛋白结构而是通过扰乱其与其它蛋白的结合能力,进而打断关键信号通路的传递。通过与突变型蛋白进行比较,研究人员可以借助下拉实验直接判断突变对蛋白互作能力的影响,为疾病的分子病因提供实验证据。同时,在药物开发中,蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析也可用于评估药物分子是否影响某一关键互作的稳定性,辅助判断其作用机制或潜在副作用。
蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析的基本流程通常包括构建融合蛋白、细胞裂解、亲和纯化和检测四个核心步骤。研究人员首先将感兴趣的“诱饵蛋白”与标签(如GST、FLAG、HA、His等)融合表达,然后将其固定在特定亲和基质上,如磁珠或琼脂糖凝胶。当细胞裂解液中含有潜在“猎物蛋白”与诱饵蛋白发生结合时,这些复合物会被共同沉淀下来。随后,通过洗脱与检测步骤即可分析这些与诱饵蛋白特异性结合的蛋白种类。蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析既可以用于验证某两个蛋白之间是否存在结合关系,也可通过质谱等高通量手段筛选出新的互作蛋白,扩展已有的蛋白互作网络。
在不同的研究需求下,蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析可以采用多种变体方法,例如GST下拉实验、FLAG免疫共沉淀(Co-IP)分析或基于标签的串联亲和纯化(TAP)策略。每种方法都根据实验目的、样品来源、蛋白表达水平和互作稳定性进行相应优化。尽管这种方法操作相对简单、易于实施,但实验条件(如缓冲液组成、蛋白浓度、洗脱方式等)对结果准确性有显著影响。因此,在数据解读时必须严格控制假阳性与假阴性风险,尤其是在筛选新的互作蛋白时,蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析必须与其它互作验证方法(如BLI、SPR、Y2H等)联合使用,确保互作关系的真实性与生物学意义。
从技术演进的角度看,蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析已逐步与质谱检测技术深度整合,形成高通量的蛋白互作筛选体系。例如,免疫沉淀结合液相色谱-串联质谱(IP-LC-MS/MS)分析已成为当前最常用的互作蛋白识别手段之一。通过这一方式,研究人员不仅能识别互作蛋白的种类,还能分析其修饰状态、亚型构成、表达丰度等更丰富的信息。蛋白质 - 蛋白质相互作用下拉分析正从单一的二元互作检测手段,拓展为多维度、多角度的蛋白质网络分析平台。
百泰派克生物科技在蛋白互作研究领域积累了丰富经验,提供专业、高灵敏度的Pull-down靶蛋白质谱鉴定服务。我们依托标准化实验流程与先进质谱平台,支持从诱饵构建、互作筛选到数据挖掘的全流程服务,帮助客户高效探索复杂蛋白网络中的关键节点与调控机制。
百泰派克生物科技特色项目
一、蛋白测序
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析,提供基于质谱的蛋白测序分析服务,包括对蛋白质的氨基酸组成分析,N端测序,C端测序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质,提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务,对蛋白序列进行分析。
※服务优势:
1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;
3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;
4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;
5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug,即可完成检测;
6.测序不受N端封闭,PEC和和糖基化等N端修饰的影响。
二、蛋白质组学
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务,助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。
※服务优势:
1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析,发现新的生物标记物;
2.体内体外多种蛋白质标记方法,适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;
3.质谱分析灵敏度高,实验结果重复度高;
4.可检测较低丰度蛋白,线性范围广;
5.专业生物信息学分析,分析更系统准确。
三、单细胞质谱流式技术分析
百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析,采用金属元素标记物(通常是金属元素标记的特异抗体)标记细胞表面和内部的分子,然后用流式细胞原理分离单个细胞,再用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析单个细胞的原子质量谱,最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。
※服务优势:
1.技术先进,填补技术空白
采用金属标记抗体技术,避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征,百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。
2.分析数量大,成本较低
单细胞RNAseq受成本等因素限制,所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右,而流式质谱技术一次(单样本)就可分析至少10^5的细胞,实现了数量级的提高,且成本不高于单细胞RNAseq。
3.应用前景大
①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化,在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景;
②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外,质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰;
③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现
百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析,可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究,旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案,深入挖掘未知的靶标。
五、生物药物表征
百泰派克基于高分辨率质谱技术,MALDI TOF,高效色谱分离技术,提供一系列完善的生物药物分析方案,从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析,到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务,帮助生物医药生产商提高生物药物品质。
百泰派克生物科技七大检测平台
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。
1.公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;
2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;
3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;
4.七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;
5.服务3000+企业,10000+客户的选择;
6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!